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　　应用血液核酸检测技术(nucleic　acid　test，NAT)对HBV、HCV和HIV感染者进行检测，其”窗口期”较抗体检测窗口期大大缩短，且能检出病毒抗体或抗原阴性的慢性携带者及变异株病毒的感染者，在许多发达国家和地区已普遍应用于献血者血液筛查[1]。目前，随着《血站技术操作规程(2012版)》的颁布，我国采供血机构血液筛查核酸检测技术正在逐步推广。核酸检测技术中的室内质量控制是保证日常检测结果可靠性的重要环节，本实验室前一阶段使用基于转录介导的扩增法(transcription-mediated　amplication，TMA)技术的诺华PROCLEIX　TIGRIS系统，进行血液筛查标本的检测，由于目前尚未见TMA扩增技术室内质控方法的相关报道，所以对使用外部标准物质进行基于TMA技术的核酸检测过程的室内质控方法和意义进行探索，现将有关情况报道如下。

　　材料与方法

　　1　材料

　　1.1　主要仪器与试剂：PROCLEIX　TIGRIS系统、PROCLEIX　ULTRIO 联检检测试剂盒(美国诺华生物诊断公司)，批号603009、609833，操作严格按照仪器、试剂说明书和本实验室SOP进行。

　　1.2　外部阳性标准物质

　　1.2.1　外部标准物质的选择：参照ELISA试验中尽可能选定室内质控品浓度接近检出限的原则，HBV　DNA含量至少为检出限的5倍，HIV　RNA和HCV　RNA 含量至少为检出限的3～4倍[2]。试剂说明书提供数据显示HBV　DNA项目95%检出限为10.4IU/ml，HCVRNA项目95%检出限为3.0IU/ml，HIV　RNA项目95%检出限为45IU/ml，同时考虑影响外部标准物质运输途中的冷链保证、长时间保存、不同核酸的降解速度和易降解程度等因素后，选择HBV　DNA外部标准物质浓度为50IU/ml、HCV　RNA外部标准物质浓度为50IU/ml、HIV　RNA外部标准物质浓度为200IU/ml。

　　1.2.2　外部标准物质来源、批号及浓度：购自康彻斯坦生物，标准物质浓度选择及批号为：HBVDNA 浓度50IU/ml，批号201201001、201304001;HCV　RNA 浓度50IU/ml，批号201112002、201304001;HCV　RNA 浓度200IU/ml，批号201203001、201304001。

　　1.3　PROCLEIX　ULTRIO质控品及校准品。

　　1.4　室内质控数据来源：2012年10月～2013年6月血液核酸筛查的室内质控外部阳性标准物质检测数据，包括HBV　DNA、HCV　RNA以及HIVRNA阳性标准物质检测数据。

　　2　方法

　　2.1　外部阳性标准物质每日随当日血液筛查标本一同进行核酸单人份联检，每日检测一套3个项目的外部标准物质。

　　2.2　汇总检测数据，剔除离群值后，计算每个项目阳性标准物质检测值的均值、标准差和变异系数。

　　2.3　数据统计：箱体图法使用SPSS17.0软件包，计算数据上四分位数(Q3)，下四分位数(Q1)和四分位距(IQR)，IQR=Q3-Q1;绘制箱体图判定离群值或通过计算判定离群值：当检测值X>Q3+1.5×IQR或X16.815或X<11.215即为离群，HCV　RNA 外部标准物质检测值X>9.36或X<6.28即为离群，HIV　RNA外部标准物质检测值X>20.05或X<12.925即为离群。3个项目各次实验检测的外部标准物质检测值箱体图见表1和图1～3。